Na produção de etanol de segunda geração o transporte dos açúcares para o interior da levedura saccharomyces cerevisiae constitui um passo limitante, principalmente no caso da pentose xilose, o segundo açúcar mais abundante na biomassa lignocelulósica. para caracterizar o efeito de diferentes transportadores na fermentação de xilose, neste trabalho foi utilizada uma linhagem hxt-null de s. cerevisiae (hxt1-hxt7? e gal2?), mas capaz de metabolizar xilose devido à sobre-expressão dos genes xyl1, xyl2 e xks1 que codificam as enzimas xilose redutase, xilitol desidrogenase e xilulocinase, respectivamente. essa linhagem hxt-null foi utilizada para expressar transportadores de s. cerevisiae e de leveduras fermentadoras de xilose scheffersomyces stipitis, spathaspora arborariae e spathaspora passalidarum. os resultados indicam que nenhuma das permeases de s. cerevisiae analisadas (hxt1, hxt2, hxt5 e hxt7) possui propriedades adequadas para captação de xilose, quando esta é a única fonte de carbono ou em misturas de xilose/glicose. uma biblioteca genômica de s. stipitis foi inserida na linhagem hxt-null, resultando na clonagem de três permeases que realizam o transporte de xilose: o já conhecido transportador xut1 e duas novas permeases (hxt2.6 e qup2) que ainda não tinham sido caracterizadas nessa levedura. no entanto, nenhuma dessas proteínas mostrou-se específica para xilose, pois também captam hexoses presentes no meio. o genoma sequenciado das leveduras s. arborariae e s. passalidarum foi analisado na busca por genes com homologia à transportadores de xilose, e três genes selecionados foram clonados e expressos na linhagem hxt-null. desses, apenas a permease sut1 de s. passalidarum realizou transporte de xilose (além de outras hexoses) e, quando o gene hxt4 de s. arborariae era expresso, não houve consumo ou fermentação de nenhum dos açúcares testados. outra permease dessa levedura (get1) apresentou uma característica peculiar, ocorrendo a captação de xilose apenas quando maltose ou outras fontes de carbono estavam presentes. os resultados indicam que a caracterização de novos transportadores de açúcares presentes no genoma de leveduras fermentadoras de xilose é necessária para desenvolver novas estratégias para otimizar a fermentação de hidrolisados lignocelulósicos por linhagens de s. cerevisiae recombinantes.