Objetivo: estimar a soroprevalência de hiv, sífilis e hepatite b em doadoras de leite cadastradas em uma maternidade de referência na região norte do estado de santa catarina. método: estudo transversal com base em dados secundários coletados no laboratório (soroprevalência) e em uma maternidade na região norte de santa catarina, no período de 2005 a 2015. as variáveis independentes incluíram as sociodemográficas (idade), clínicas (gestação anterior) e o uso de serviço médico durante a gestação (consultas pré-natal). os intervalos de confiança de 95% foram calculados usando a distribuição de poisson. resultados: para hiv as prevalências por 100.000 gestantes foram de 155; 170 e zero nos três períodos analisados (2005-2009, 2010-2012 e 2013-2015), respectivamente. para sífilis as prevalências por 100.000 gestantes foram de 509, 460 e 1749 nos três períodos analisados. para hbsag, um marcador da infecção recente para hepatite b, as prevalências na mesma escala foram de 254, 231 e 299, respectivamente, enquanto as prevalências do anti-hbc, um marcador de risco cumulativo da infecção por hepatite b durante a vida, foram de 7339 no período 2010-2012 e 3874 no período 2013-2015. conclusão: apesar dos exames laboratoriais preconizados durante pré-natal e no parto, foram encontradas nutrizes infectadas por hiv, sífilis e hepatite b. mesmo com a redução do hiv em nutrizes em período mais recente, houve um aumento da prevalência de sífilis e hepatite b.