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Universidade Federal de Santa catarina (UFSC)
Programa de Pós-graduação em Engenharia, Gestão e Mídia do Conhecimento (PPGEGC)
Detalhes do Documento Analisado

Centro: Ciências Biológicas

Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia e Biociências

Dimensão Institucional: Pós-Graduação

Dimensão ODS: Institucional

Tipo do Documento: Dissertação

Título: IDENTIFICAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR E TRANSCRICIONAL DE CRUSTINAS DO TIPO I NO CAMARÃO LITOPENAEUS VANNAMEI

Orientador
  • RAFAEL DIEGO DA ROSA
Aluno
  • CAIRE BARRETO VIEIRA

Conteúdo

Peptídeos antimicrobianos (amps) são moléculas essenciais do sistema imune de diversos organismos, participando eficientemente no combate a uma ampla variedade de microrganismos patogênicos. em camarões, quatro principais famílias de amps foram descritas, dentre as quais se destacam as crustinas. essa família encontra-se distribuída em diversas espécies de crustáceos e apresenta atividades antimicrobianas e antiproteolíticas. classicamente, as crustinas estão divididas em 5 principais grupos, referidos como tipos i a v. no camarão litopenaeus vannamei, apesar de terem sido reportadas crustinas dos tipos ii, iii e iv, até o presente ainda não foram descritas crustinas do tipo i. neste contexto, o objetivo do presente trabalho foi identificar e caracterizar, em nível molecular e transcricional, crustinas do tipo i em l. vannamei. sequências de crustinas do tipo i foram buscadas em bancos transcriptômicos não anotados de l. vannamei (genbank), submetidas a reconstruções filogenéticas para confirmação de sua autenticidade e usadas no desenho de iniciadores para análises de expressão gênica. doze sequências de l. vannamei foram resgatadas utilizando-se 41 sequências de crustinas do tipo i de 22 espécies de crustáceos como referência. as análises filogenéticas indicaram a existência de, pelo menos, dois subtipos de crustinas do tipo i em l. vannamei: lvcrus ia (10 sequências) e lvcrus ib (2 sequências). os dois subtipos compartilharam uma alta identidade aminoacídica (>80%) e uma estrutura condizente com as crustinas do tipo i: um peptídeo sinal seguido de um peptídeo maduro contendo doze resíduos de cisteína, oito dos quais compondo o domínio conservado wap (whey acidic protein), característico desses amps. as análises moleculares mostraram um ponto isoelétrico teórico de 5,01-5,64 para lvcrus ia (massa molecular de 9,6 kda) e 7,66 para lvcrus ib (massa molecular de 11,5 kda). a expressão de crustinas do tipo i mostrou um perfil similar de expressão em diferentes tecidos dos animais após um estímulo bacteriano. interessantemente, lvcrus ia e lvcrus ib mostraram-se altamente expressos nas brânquias de animais estimulados e não estimulados, mas não nos hemócitos que são as células imuncompetentes de camarões. para fins comparativos, a distribuição das demais crustinas de l. vannamei também foi investigada. as crustinas do tipo ii (iia e iib) mostraram uma distribuição idêntica, estando presentes em hemócitos e brânquias e as crustinas dos tipos iii e iv foram unicamente hemocitárias. os níveis transcricionais de lvcrus ia foi analisado no intestino médio de animais 48 horas após uma infecção experimental por dois patógenos de camarões: o vírus da síndrome da mancha branca (wssv) ou a bactéria vibrio harveyi. a expressão de lvcrus ia apresentou um aumento superior a 50 vezes em animais inoculados com água do mar estéril e com a bactéria v. harveyi, mas não houve diferença entre esses dois tratamentos. analogamente, não houve modulação na expressão de lvcrus ia após o desafio viral. nos hemócitos, apenas as crustinas do tipo iv (lvslpi) foram induzidas após a infecção bacteriana. as crustinas do tipo i de camarões peneídeos compõem, portanto, um grupo diverso de amps tanto em termos de estrutura primária, características bioquímicas e no perfil de expressão gênica. ademais, este trabalho representa o primeiro relato de crustinas aniônicas e de um grupo de amps não hemocitários em l. vannamei.

Pós-processamento: Índice de Shannon: 3.95431

ODS 1 ODS 2 ODS 3 ODS 4 ODS 5 ODS 6 ODS 7 ODS 8 ODS 9 ODS 10 ODS 11 ODS 12 ODS 13 ODS 14 ODS 15 ODS 16
5,81% 5,91% 8,76% 6,38% 6,49% 4,47% 5,48% 6,42% 6,18% 6,39% 6,49% 4,54% 4,24% 8,04% 4,11% 10,26%
ODS Predominates
ODS 16
ODS 1

5,81%

ODS 2

5,91%

ODS 3

8,76%

ODS 4

6,38%

ODS 5

6,49%

ODS 6

4,47%

ODS 7

5,48%

ODS 8

6,42%

ODS 9

6,18%

ODS 10

6,39%

ODS 11

6,49%

ODS 12

4,54%

ODS 13

4,24%

ODS 14

8,04%

ODS 15

4,11%

ODS 16

10,26%