Universidade Federal de Santa catarina (UFSC)
Programa de Pós-graduação em Engenharia, Gestão e Mídia do Conhecimento (PPGEGC)
Detalhes do Documento Analisado
Centro: Ciências Biológicas
Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia e Biociências
Dimensão Institucional: Pós-Graduação
Dimensão ODS: Institucional
Tipo do Documento: Dissertação
Título: IDENTIFICAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR E TRANSCRICIONAL DE CRUSTINAS DO TIPO I NO CAMARÃO LITOPENAEUS VANNAMEI
Orientador
- RAFAEL DIEGO DA ROSA
Aluno
- CAIRE BARRETO VIEIRA
Conteúdo
Peptídeos antimicrobianos (amps) são moléculas essenciais do sistema imune de diversos organismos, participando eficientemente no combate a uma ampla variedade de microrganismos patogênicos. em camarões, quatro principais famílias de amps foram descritas, dentre as quais se destacam as crustinas. essa família encontra-se distribuída em diversas espécies de crustáceos e apresenta atividades antimicrobianas e antiproteolíticas. classicamente, as crustinas estão divididas em 5 principais grupos, referidos como tipos i a v. no camarão litopenaeus vannamei, apesar de terem sido reportadas crustinas dos tipos ii, iii e iv, até o presente ainda não foram descritas crustinas do tipo i. neste contexto, o objetivo do presente trabalho foi identificar e caracterizar, em nível molecular e transcricional, crustinas do tipo i em l. vannamei. sequências de crustinas do tipo i foram buscadas em bancos transcriptômicos não anotados de l. vannamei (genbank), submetidas a reconstruções filogenéticas para confirmação de sua autenticidade e usadas no desenho de iniciadores para análises de expressão gênica. doze sequências de l. vannamei foram resgatadas utilizando-se 41 sequências de crustinas do tipo i de 22 espécies de crustáceos como referência. as análises filogenéticas indicaram a existência de, pelo menos, dois subtipos de crustinas do tipo i em l. vannamei: lvcrus ia (10 sequências) e lvcrus ib (2 sequências). os dois subtipos compartilharam uma alta identidade aminoacídica (>80%) e uma estrutura condizente com as crustinas do tipo i: um peptídeo sinal seguido de um peptídeo maduro contendo doze resíduos de cisteína, oito dos quais compondo o domínio conservado wap (whey acidic protein), característico desses amps. as análises moleculares mostraram um ponto isoelétrico teórico de 5,01-5,64 para lvcrus ia (massa molecular de 9,6 kda) e 7,66 para lvcrus ib (massa molecular de 11,5 kda). a expressão de crustinas do tipo i mostrou um perfil similar de expressão em diferentes tecidos dos animais após um estímulo bacteriano. interessantemente, lvcrus ia e lvcrus ib mostraram-se altamente expressos nas brânquias de animais estimulados e não estimulados, mas não nos hemócitos que são as células imuncompetentes de camarões. para fins comparativos, a distribuição das demais crustinas de l. vannamei também foi investigada. as crustinas do tipo ii (iia e iib) mostraram uma distribuição idêntica, estando presentes em hemócitos e brânquias e as crustinas dos tipos iii e iv foram unicamente hemocitárias. os níveis transcricionais de lvcrus ia foi analisado no intestino médio de animais 48 horas após uma infecção experimental por dois patógenos de camarões: o vírus da síndrome da mancha branca (wssv) ou a bactéria vibrio harveyi. a expressão de lvcrus ia apresentou um aumento superior a 50 vezes em animais inoculados com água do mar estéril e com a bactéria v. harveyi, mas não houve diferença entre esses dois tratamentos. analogamente, não houve modulação na expressão de lvcrus ia após o desafio viral. nos hemócitos, apenas as crustinas do tipo iv (lvslpi) foram induzidas após a infecção bacteriana. as crustinas do tipo i de camarões peneídeos compõem, portanto, um grupo diverso de amps tanto em termos de estrutura primária, características bioquímicas e no perfil de expressão gênica. ademais, este trabalho representa o primeiro relato de crustinas aniônicas e de um grupo de amps não hemocitários em l. vannamei.
Pós-processamento: Índice de Shannon: 3.95431
| ODS 1 | ODS 2 | ODS 3 | ODS 4 | ODS 5 | ODS 6 | ODS 7 | ODS 8 | ODS 9 | ODS 10 | ODS 11 | ODS 12 | ODS 13 | ODS 14 | ODS 15 | ODS 16 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 5,81% | 5,91% | 8,76% | 6,38% | 6,49% | 4,47% | 5,48% | 6,42% | 6,18% | 6,39% | 6,49% | 4,54% | 4,24% | 8,04% | 4,11% | 10,26% |
ODS Predominates
5,81%
5,91%
8,76%
6,38%
6,49%
4,47%
5,48%
6,42%
6,18%
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4,54%
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