A cultura de segurança do paciente é discutida mundialmente sendo considerada um elemento essencial para os sistemas de saúde. entre as estratégias para melhorar a segurança do paciente em unidades de terapia intensiva neonatal (utin), está a incorporação de uma cultura de segurança, pois nestes locais os riscos à saúde podem ser maiores em virtude das particularidades dos neonatos e de um ambiente amplamente tecnológico e intervencionista. no entanto, para propor medidas mais seguras, primeiramente, é fundamental conhecer a cultura dessas unidades e identificar os fatores que implicam ou melhoram a segurança neste contexto. para tanto, o objetivo deste estudo foi analisar a cultura de segurança do paciente na perspectiva da equipe de enfermagem e equipe médica de unidades de terapia intensiva neonatal por meio do instrumento hospital survey on patient safety culture (hsopsc). trata-se de um estudo quantitativo, tipo survey, com amostra intencional, não probabilística, totalizando 151 sujeitos. os dados foram coletados em quatro utin de hospitais públicos da região da grande florianópolis, santa catarina, brasil, entre fevereiro a abril de 2013, por meio da aplicação do instrumento hsopsc, sendo que este avalia 12 dimensões da cultura. a pesquisa recebeu aprovação do comitê de ética, nº 128.478. para análise dos dados realizou-se estatística descritiva, classificando as dimensões em áreas de força ou críticas, e ainda, estatística inferencial para testar a diferença entre a avaliação da cultura e as características profissionais dos sujeitos, utilizando os testes kruskall-wallis, qhi-quadrado e alpha de cronbach para a confiabilidade do instrumento. realizaram a devolução do hsopsc, 142 sujeitos, sendo que destes, 1 (um) não foi incluído no banco de dados, pois o instrumento estava incompleto em mais da metade, sendo assim o número final de participantes de 141, obtendo taxa de resposta global de 94%. os resultados mostraram que não há área de força, contudo, aquelas que receberam mais respostas positivas foram: “expectativas e ações do para promoção da segurança do supervisor/chefia”(61%) e “aprendizado organizacional – melhoria contínua”(59%). como área crítica, identificamos aquelas com maior percentual de respostas negativas: “resposta não punitiva ao erro”(58%) e “apoio da gestão hospitalar para segurança”(51%). verificou-se a diferença do número de respostas positivas do hsopsc, nota de segurança e número de eventos comunicados, conforme características profissionais dos sujeitos, sendo que houve diferença significava do menor “tempo de trabalho no hospital” e “tempo de trabalho na unidade” com um maior número de respostas positivas; maior “tempo de trabalho na profissão” representou melhores notas e maior número de eventos comunicados. menor “carga horária semanal de trabalho” correspondeu melhores notas e menos eventos comunicados. médicos avaliaram mais positivamente a cultura. alpha de cronbach variou de 0.43 a 0.88, demonstrando confiabilidade do instrumento. os resultados revelam que a cultura de segurança nas utin apresenta áreas potenciais para se tornarem de força, contudo, são necessárias mudanças culturais, principalmente na abordagem dos erros, considerando que persiste uma resposta punitiva. ainda, as diferenças encontradas nos remetem a uma possível relação da avaliação da cultura de segura com as características profissionais dos sujeitos das utin.