A utilização de fluido supercrítico para fracionamento e purificação de misturas complexas tem sido cada vez mais estudada e aplicada em diferentes matrizes durante as últimas décadas. este processo apresenta uma tecnologia inovadora para a remoção seletiva de monoterpenos e a purificação ou enriquecimento de terpenos oxigenados bioativos. estes compostos possuem um alto potencial na indústria farmacêutica, cosmética e de alimentos. a pimenta rosa (schinus terebinthifolius raddi), membro da família anacardiaceae e amplamente distribuída ao longo da costa do território brasileiro, possui várias ações terapêuticas, tais como: cicatrizante, antisséptica, antifúngica e antiinflamatória. além destas, recentemente a pimenta rosa apresentou potencial citotóxico em linhagens de células cancerosas. visando a aplicação de compostos bioativos de schinus terebinthifolius raddi na área biomédica, este trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de um protocolo para a obtenção e separação destes compostos a partir de extração com fluido supercrítico. para isto, diferentes condições operacionais de extração foram avaliadas. os resultados obtidos apresentaram a existência de duas frações com diferente composição química, quando 80 bar de pressão a 35°c foram utilizados. esta condição de operação apresentou o melhor fracionamento dos extratos. com a finalidade de otimizar a metodologia de separação utilizada, foi realizada uma avaliação do comportamento dos compostos químicos ao longo do processo de extração. a primeira fração obtida do extrato apresenta os seguintes compostos majoritários: alfa-felandreno, delta-3-carene e limoneno, enquanto que a segunda, beta-elemen-7 alfa-ol, elemol e beta-elemene. avaliação da atividade citotóxica das frações em linhagens de células leucêmicas (leucemia mielóide crônica agudizada e leucemia aguda linfoblástica) foi realizada. de acordo com os resultados obtidos observou-se que fração 1 obtida na condição operacional de 80 bar e 35 c apresenta alta atividade citotóxica, muito maior inclusive quando comparada à atividade do óleo essencial obtido pela técnica tradicional de hidrodestilação, enquanto que a fração2 apresentou um estímulo para o crescimento das células cancerígenas.