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Universidade Federal de Santa catarina (UFSC)
Programa de Pós-graduação em Engenharia, Gestão e Mídia do Conhecimento (PPGEGC)
Detalhes do Documento Analisado

Centro: Ciências da Saúde

Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Farmácia

Dimensão Institucional: Pós-Graduação

Dimensão ODS: Econômica

Tipo do Documento: Tese

Título: EXPANSÃO EX VIVO DE CÉLULAS-TRONCO/PROGENITORAS HEMATOPOIÉTICAS DE SANGUE DE CORDÃO UMBILICAL E PLACENTÁRIO

Ano: 2014

Orientador
  • MARCIO ALVAREZ DA SILVA
Aluno
  • ALOISIO LUIZ BENEDETTI

Conteúdo

As células-tronco progenitoras hematopoiéticas (ctphs) do sangue de cordão umbilical e placentário (scup) tem sido utilizadas no tratamento de diversas doenças hematológicas neoplásicas ou não. o emprego de ctphs do scup apresenta como principais vantagens a facilidade de obtenção, a ausência de riscos para a mãe e o(a) doador(a), disponibilidade de uso imediato pelo armazenamento de unidades testadas e tipadas para antígeno leucocitário humano (hla), menor frequência e gravidade da doença do enxerto contra o hospedeiro (dech) e a não exigência de total paridade na tipagem hla. como principais limitações estão o número reduzido de ctphs que o scup pode prover para um transplante em função do volume limitado e a demora na pega do enxerto. por sua vez, o sucesso do transplante de ctphs é dependente da dose celular transplantada por kg de peso corporal do receptor, o que praticamente restringe a utilização do scup a pessoas com peso corporal até 50 kg. para suplantar essa limitação têm sido utilizadas estratégias que envolvem o estabelecimento de critérios para a seleção e armazenamento das unidades de scup, transplante de mais de uma unidade de scup e a expansão ex vivo das ctphs do scup. a cultura das ctphs sem células do microambiente hematopoiético priva as ctphs das interações celulares e moleculares que ocorrem no mesmo. o presente trabalho tem por objetivo avaliar a expansão ex vivo de ctphs do scup, utilizando a co-cultura com células-tronco mesenquimais (ctms) obtidas da membrana coriônica (mc) e do vilo de placentas humanas para suporte da hematopoiese em ambiente 2d e 3d. para isso as ctms foram caracterizadas morfologicamente e imunofenotipicamente (cd73, cd90, cd105, cd34 e cd45) e analisadas quanto à expressão gênica quantitativa das citocinas de interesse hematopoiético scf, flt3-l, tpo, il6, il16 e sdf1, nas passagens p1, p5 e p10. no scup foi realizado hemograma, contagem e separação de células cd34+ e subpopulações e avaliado o potencial clonogênico. foram investigadas correlações entre os fatores materno-fetais e parâmetros do scup, taxas de expansão ex vivo e entre os próprios parâmetros do scup. para expansão ex vivo foram realizadas co-culturas com ctms da mc em p1 e do vilo em p5, em ambiente 2d e co-culturas com ctms do vilo em p5, em ambiente 3d constituído de uma matriz de colágeno i e 6-sulfato de condroitina. os resultados demonstraram que as ctms da mc e do vilo apresentam características morfológicas e imunofenotípicas típicas de ctms e expressam as citocinas de interesse hematopoiético, nas três passagens analisadas. as ctms da mc em p1 e do vilo em p5 apresentaram o melhor perfil de expressão de citocinas e foram selecionadas para os experimentos de expansão ex vivo. a análise das correlações entre os diferentes fatores e parâmetros avaliados sugere a seleção de unidades de scup oriundas de doações com idade gestacional acima de 39,5 semanas, contagens de células nucleadas totais (cnt) acima de 13,05 x 106 células por ml, percentagem de eritroblastos (nrbc) maior de 2,875% e com contagem de células cd34+ superiores a 23,73 x 103 células por ml, para obtenção de amostras de melhor conteúdo hematopoiético e mais apropriadas para a expansão ex vivo. o suporte das ctms foi crucial para a expansão ex vivo das ctphs. as ctms do vilo em p5 promoveram melhores taxas de expansão das ctphs que as da mc em p1, em ambiente 2d e foram selecionadas para a expansão em ambiente 3d. a expansão das ctphs com ctms do vilo em ambiente 2d demonstrou melhores taxas de expansão que no ambiente 3d. com base nos resultados conclui-se que a melhor condição para expansão ex vivo de ctphs do scup, compreende a co-cultura de ctphs oriundas de doações com idade gestacional acima de 39,5 semanas, contagens de cnt acima de 13,05 x 106 por ml, percentagem de nrbc igual ou maior de 2,875% e com contagem de células cd34+ superiores a 23,73 x 103 células por ml, em ambiente 2d e com suporte de ctms do vilo em p5.

Pós-processamento: Índice de Shannon: 3.93939

ODS 1 ODS 2 ODS 3 ODS 4 ODS 5 ODS 6 ODS 7 ODS 8 ODS 9 ODS 10 ODS 11 ODS 12 ODS 13 ODS 14 ODS 15 ODS 16
5,69% 6,87% 9,04% 6,02% 6,25% 4,36% 6,54% 6,59% 10,97% 3,87% 7,56% 4,50% 4,01% 4,92% 5,11% 7,71%
ODS Predominates
ODS 9
ODS 1

5,69%

ODS 2

6,87%

ODS 3

9,04%

ODS 4

6,02%

ODS 5

6,25%

ODS 6

4,36%

ODS 7

6,54%

ODS 8

6,59%

ODS 9

10,97%

ODS 10

3,87%

ODS 11

7,56%

ODS 12

4,50%

ODS 13

4,01%

ODS 14

4,92%

ODS 15

5,11%

ODS 16

7,71%