A susceptibilidade à infecção pelo vírus da hepatite b (hbv) e necessidade de doses de reforço da vacina entre indivíduos que apresentam níveis séricos do anticorpo contra o antígeno de superfície (anti-hbs) inferiores a 10 ui/l após a imunização primária permanecem indefinidas. neste trabalho, o objetivo foi avaliar a resposta anamnéstica ao desafio in vitro e in vivo com o antígeno de superfície do vírus da hepatite b (hbsag) em indivíduos vacinados. foram analisadas as propriedades antigênicas da proteína vacinal hbsag recombinante em sistema de cultura, e realizada a padronização do ensaio in vitro de proliferação de linfócitos frente à estimulação com o antígeno vacinal. dentro das condições experimentais ideais pré-estabelecidas, foi realizada a análise in vitro da resposta anamnéstica à exposição ao hbsag recombinante em amostras de voluntários que receberam o esquema completo (3 doses) de vacinação contra o hbv. a resposta anamnéstica ao estímulo in vivo foi analisada pela determinação dos títulos séricos de anti-hbs após o reforço da vacina. o antígeno vacinal hbsag recombinante estimulou a proliferação linfocitária em culturas de células de indivíduos vacinados. os maiores índices de proliferação foram verificados em suspensões na concentração de 4×106 células/ml, estimuladas com 50 ng/ml de hbsag recombinante durante 3 dias. as respostas humorais ao desafio antigênico in vitro não se correlacionaram significativamente com os níveis séricos do anticorpo. uma resposta in vitro de anticorpos de alta avidez foi verificada em 60,0%, 40,0% e 66,7% dos indivíduos que apresentaram níveis séricos de anti-hbs indetectáveis, <10 ui/l e ?10 ui/l, respectivamente. na análise in vivo da memória imunológica ao hbv, a proporção de indivíduos que apresentaram uma resposta humoral anamnéstica à dose unitária de reforço foi de 63,0%. o índice de participantes que apresentaram títulos do anticorpo ?10 ui/l em 4 meses, 1 ano e 2 anos decorridos da administração de uma dose desafio foi de 66,7%, 50,0% e 70,0%, respectivamente. todos os indivíduos que receberam três doses apresentaram títulos séricos de anti-hbs ?10 ui/l 2 anos após a revacinação, sendo que em 80,0% dos casos foram verificados níveis do anticorpo acima de 100 ui/l. os resultados observados neste estudo sugerem a persistência da memória imunológica para o hbv em indivíduos vacinados que apresentam títulos séricos de anti-hbs inferiores a 10 ui/l ou indetectáveis.