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Universidade Federal de Santa catarina (UFSC)
Programa de Pós-graduação em Engenharia, Gestão e Mídia do Conhecimento (PPGEGC)
Detalhes do Documento Analisado

Centro: Ciências Biológicas

Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia e Biociências

Dimensão Institucional: Pós-Graduação

Dimensão ODS: Social

Tipo do Documento: Tese

Título: ESTUDO DAS SIALIDASES DE TRYPANOSOMA RANGELI : CARACTERIZAÇÃO GENÔMICA E EXPRESSÃO HETERÓLOGA DE UMA TRANS-SIALIDASE

Ano: 2014

Orientador
  • EDMUNDO CARLOS GRISARD
Aluno
  • ALINE DAIANE SCHLINDWEIN

Conteúdo

A família das trans-sialidases (ts) é a maior família gênica de trypanosoma cruzi. o grupo ii da superfamília ts reúne diversas glicoproteínas (entre elas, a gp82 e a gp85) presentes na superfície das formas tripomastigotas do t. cruzi. a gp82 está envolvida no processo de adesão do parasito à célula hospedeira e a gp85 na adesão e penetração. embora sialidases estejam presentes no t. rangeli, a função destas proteínas no ciclo de vida deste parasito ainda não foi esclarecida. em função disso, o objetivo deste estudo foi estudar os genes de t. rangeli relacionados à superfamília das ts e avaliar a expressão heteróloga da gp82 de t. cruzi por t. rangeli (t. rangeli-gp82). inicialmente, foram identificadas no genoma do t. rangeli oito orfs completas similares a gp82 e gp85 de t. cruzi. por se tratar de várias cópias gênicas, diferentes sequências foram analisadas a partir de amplificação e clonagem destes genes em duas cepas de t. rangeli. as sequências avaliadas continham de um a dois motivos asp, um motivo subterminal, sítio de ancoramento a gpi e um domínio que pertence a superfamília das glucanases/lectina tipo concanavalina a. após a obtenção da cepa recombinante t. rangeli-gp82, observou-se que a gp82 foi expressa na superfície dos parasitos de forma semelhante ao t. cruzi. além disso, a expressão da gp82 não interferiu nos padrões de crescimento e de diferenciação in vitro do t. rangeli. em ensaios de interação destes parasitos com células vero, verificamos um maior número de parasitos da cepa t. rangeli-gp82 nas células hospedeiras em relação à cepa selvagem, além de um maior número de parasitos aderidos às células em relação as demais cepas analisadas. tanto as formas epimastigotas quanto tripomastigotas de t. rangeli-gp82 foram capazes de mobilizar cálcio intracelular. estes resultados diferem do observado na interação com células thp-1, onde não verificamos diferença significativa entre t. rangeli-gp82 e as demais cepas analisadas. em triatomíneos, verificamos que a cepa t. rangeli-gp82 apresenta desenvolvimento semelhante à cepa selvagem, sendo capaz de colonizar a hemolinfa e invadir as glândulas salivares de r. prolixus. em camundongos, tripomastigotas de todas as cepas de t. rangeli foram observados na corrente sanguínea de animais c57bl/6 infectados via intraperitoneal, porém não foi observada proliferação, sendo a cinética parasitêmica similar para todas as cepas do t. rangeli. quando estes camundongos foram desafiados com t. cruzi, não observamos alteração na parasitemia deste parasito em relação à infecção controle, entretanto houve uma diminuição do parasitismo tecidual por este parasito nos animais pré-infectados com as três cepas de t. rangeli, principalmente t. rangeli-selvagem e gfp. com estes resultados, podemos inferir que a proteína gp82 facilita a adesão e penetração do parasito a célula hospedeira, entretanto a expressão desta proteína pelo t. rangeli não promove uma proteção substancial contra a infecção por t. cruzi.

Pós-processamento: Índice de Shannon: 3.97525

ODS 1 ODS 2 ODS 3 ODS 4 ODS 5 ODS 6 ODS 7 ODS 8 ODS 9 ODS 10 ODS 11 ODS 12 ODS 13 ODS 14 ODS 15 ODS 16
6,38% 5,81% 8,03% 5,56% 6,91% 4,03% 4,79% 6,79% 6,71% 5,32% 6,60% 6,36% 4,49% 7,61% 6,65% 7,94%
ODS Predominates
ODS 3
ODS 1

6,38%

ODS 2

5,81%

ODS 3

8,03%

ODS 4

5,56%

ODS 5

6,91%

ODS 6

4,03%

ODS 7

4,79%

ODS 8

6,79%

ODS 9

6,71%

ODS 10

5,32%

ODS 11

6,60%

ODS 12

6,36%

ODS 13

4,49%

ODS 14

7,61%

ODS 15

6,65%

ODS 16

7,94%