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Universidade Federal de Santa catarina (UFSC)
Programa de Pós-graduação em Engenharia, Gestão e Mídia do Conhecimento (PPGEGC)
Detalhes do Documento Analisado

Centro: Ciências Agrárias

Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos

Dimensão Institucional: Pós-Graduação

Dimensão ODS: Social

Tipo do Documento: Dissertação

Título: DESENVOLVIMENTO DE MÉTODO PARA DETECÇÃO E QUANTIFICAÇÃO EVENTO-ESPECÍFICA DO FEIJOEIRO EMBRAPA 5.1 POR PCR EM TEMPO REAL (QPCR)

Ano: 2015

Orientador
  • ANA CAROLINA MAISONNAVE ARISI
Aluno
  • DIANA TREML

Conteúdo

Eentre os métodos de quantificação de ogm para rotulagem de alimentos, o método que utiliza reação em cadeia de polimerase quantitativa (qpcr) evento-específico é o mais adequado. o evento feijoeiro gm embrapa 5.1 foi aprovado para comercialização no brasil em 2011, tornando necessário a sua rotulagem em alimentos. nesse trabalho foi desenvolvido um método qpcr evento-específica para detecção de feijão gm embrapa 5.1, pelo desenho de um par de iniciadores e uma sonda para a região de junção do dna do feijão com o dna recombinante. o método foi validado utilizando-se dois protocolos para a extração do dna da folha do feijão: ctab e dneasy plant mini kit. a especificidade dos iniciadores na qpcr foi avaliada utilizando a metodologia sybr green. os iniciadores apresentaram maior especificidade quando a quantidade final de iniciadores na reação de qpcr foi de 300 nm, com elevada especificidade. a sonda taqman foi desenvolvida para aumentar a especificidade, com melhores resultados obtidos utilizando-se uma quantidade final de sonda de 250 nm. os ensaios de repetibilidade, através da amplificação das amostras compondo uma diluição seriada, apresentaram eficiências entre 85 e 103% para amostras de feijão gm embrapa 5.1 das variedades pérola e pontal extraídas com dneasy plant mini kit e de 89 e 85% para as mesmas amostras extraídas pelo método ctab. o limite de detecção do ensaio foi de 10² cópias de dna quando o dna de feijão gm foi diluído em dna de feijão não gm, utilizando a metodologia taqman. a eficiência média da qpcr com amostras de semente de feijão pérola gm embrapa 5.1 extraídas com dneasy plant mini kit, foi de 100%. o método de qpcr desenvolvido nesse trabalho apresenta parâmetros adequados quanto a especificidade, eficiência, linearidade e limite de detecção para a identificação e quantificação do evento feijão gm embrapa 5.1.

Pós-processamento: Índice de Shannon: 3.96324

ODS 1 ODS 2 ODS 3 ODS 4 ODS 5 ODS 6 ODS 7 ODS 8 ODS 9 ODS 10 ODS 11 ODS 12 ODS 13 ODS 14 ODS 15 ODS 16
4,32% 9,17% 6,08% 4,68% 5,35% 7,90% 7,44% 6,67% 4,74% 3,93% 6,85% 5,96% 7,14% 7,13% 7,34% 5,31%
ODS Predominates
ODS 2
ODS 1

4,32%

ODS 2

9,17%

ODS 3

6,08%

ODS 4

4,68%

ODS 5

5,35%

ODS 6

7,90%

ODS 7

7,44%

ODS 8

6,67%

ODS 9

4,74%

ODS 10

3,93%

ODS 11

6,85%

ODS 12

5,96%

ODS 13

7,14%

ODS 14

7,13%

ODS 15

7,34%

ODS 16

5,31%