
Universidade Federal de Santa catarina (UFSC)
Programa de Pós-graduação em Engenharia, Gestão e Mídia do Conhecimento (PPGEGC)
Detalhes do Documento Analisado
Centro: Ciências Agrárias
Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos
Dimensão Institucional: Pós-Graduação
Dimensão ODS: Social
Tipo do Documento: Dissertação
Título: DESENVOLVIMENTO DE MÉTODO PARA DETECÇÃO E QUANTIFICAÇÃO EVENTO-ESPECÍFICA DO FEIJOEIRO EMBRAPA 5.1 POR PCR EM TEMPO REAL (QPCR)
Ano: 2015
Orientador
- ANA CAROLINA MAISONNAVE ARISI
Aluno
- DIANA TREML
Conteúdo
Eentre os métodos de quantificação de ogm para rotulagem de alimentos, o método que utiliza reação em cadeia de polimerase quantitativa (qpcr) evento-específico é o mais adequado. o evento feijoeiro gm embrapa 5.1 foi aprovado para comercialização no brasil em 2011, tornando necessário a sua rotulagem em alimentos. nesse trabalho foi desenvolvido um método qpcr evento-específica para detecção de feijão gm embrapa 5.1, pelo desenho de um par de iniciadores e uma sonda para a região de junção do dna do feijão com o dna recombinante. o método foi validado utilizando-se dois protocolos para a extração do dna da folha do feijão: ctab e dneasy plant mini kit. a especificidade dos iniciadores na qpcr foi avaliada utilizando a metodologia sybr green. os iniciadores apresentaram maior especificidade quando a quantidade final de iniciadores na reação de qpcr foi de 300 nm, com elevada especificidade. a sonda taqman foi desenvolvida para aumentar a especificidade, com melhores resultados obtidos utilizando-se uma quantidade final de sonda de 250 nm. os ensaios de repetibilidade, através da amplificação das amostras compondo uma diluição seriada, apresentaram eficiências entre 85 e 103% para amostras de feijão gm embrapa 5.1 das variedades pérola e pontal extraídas com dneasy plant mini kit e de 89 e 85% para as mesmas amostras extraídas pelo método ctab. o limite de detecção do ensaio foi de 10² cópias de dna quando o dna de feijão gm foi diluído em dna de feijão não gm, utilizando a metodologia taqman. a eficiência média da qpcr com amostras de semente de feijão pérola gm embrapa 5.1 extraídas com dneasy plant mini kit, foi de 100%. o método de qpcr desenvolvido nesse trabalho apresenta parâmetros adequados quanto a especificidade, eficiência, linearidade e limite de detecção para a identificação e quantificação do evento feijão gm embrapa 5.1.
Pós-processamento: Índice de Shannon: 3.96324
ODS 1 | ODS 2 | ODS 3 | ODS 4 | ODS 5 | ODS 6 | ODS 7 | ODS 8 | ODS 9 | ODS 10 | ODS 11 | ODS 12 | ODS 13 | ODS 14 | ODS 15 | ODS 16 |
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4,32% | 9,17% | 6,08% | 4,68% | 5,35% | 7,90% | 7,44% | 6,67% | 4,74% | 3,93% | 6,85% | 5,96% | 7,14% | 7,13% | 7,34% | 5,31% |
ODS Predominates


4,32%

9,17%

6,08%

4,68%

5,35%

7,90%

7,44%

6,67%

4,74%

3,93%

6,85%

5,96%

7,14%

7,13%

7,34%

5,31%